津腾微孔滤膜在白玉蜗牛糖胺聚糖分离中的应用

导读:天津津腾实验设备有限公司了解到白玉蜗牛属柄眼目玛瑙螺科，是非洲大蜗牛的白化亚种，是我国已大量人工养殖的陆生贝壳类食材，具有丰富的营养成分和广泛的医药保健价值.天津津

来源：未知发布日期：2020-06-16 09:38【大中小】

天津津腾实验设备有限公司了解到白玉蜗牛属柄眼目玛瑙螺科，是非洲大蜗牛的白化亚种，是我国已大量人工养殖的陆生贝壳类食材，具有丰富的营养成分和广泛的医药保健价值.天津津腾实验设备有限公司了解到本文以白玉蜗牛肉为原料，对其所含的糖胺聚糖(AFG)进行提取纯化，采用具有糖苷键选择性的β-消除解聚法对AFG进行解聚，分析AFG单糖组成和硫酸羧酸摩尔比，结合AFG及dAFG的理化性质及波谱分析法解析其基本化学结构，为阐明其构效关系及药理机制奠定基础。

1.AFG和dAFG的理化性质分析
1.1紫外-可见分光光度法(UV-Vis)
分别精密称取AFG和dAFG1mg，配制成1mg/mL的水溶液，在190～400nm波长范围进行扫描.

1.2高效凝胶色谱法(HPGPC)
天津津腾实验设备有限公司了解到本文分别精密称取AFG和dAFG1mg，配制成1mg/mL的水溶液，经0.45μm天津津腾微孔滤膜过滤后，进行HPGPC分析，记录色谱图.色谱条件:ShodexOHpakSB-804HQ色谱柱;柱温，35℃;流动相为0.1mol/L氯化钠溶液;流速为0.5mL/min;进样量为50μL;检测器为示差检测器ＲID.

1.3分子量测定
分别称取10mgAFG和肝素钠，采用SEC-ＲI-MALLS联用技术测定AFG的分子量及分子量分布，委托北京理化测试中心完成.依次称取系列分子量右旋糖酐标准品，配制成浓度为10mg/mL的0.1mol/LNaCl溶液，0.45μm天津津腾微孔滤膜过滤，进样量为20μL，数据采用GPC软件处理，绘制标准曲线，用标定分子量的AFG进行校正，既得宽标校正曲线.可用于dAFG的分子量及其分布检测.PMP衍生化:供试品溶液中加入100μL0.6mol/L的氢氧化钠溶液和200μL0.5mol/L的PMP甲醇溶液，涡旋混匀;70℃衍生化反应60min;反应结束后冷却至室温，加入200μL0.3mol/L的盐酸溶液进行中和，用1mL三氯甲烷萃取3次，水相部分经0.22μm天津津腾微孔膜过滤供HPLC分析.另取单糖标准品(Glc、Gal、GlcN.HCl、GalN.HCl、IdoA)适量，加1mL水溶解，作为对照溶液，进行PMP衍生化反应.

2.结语
从白玉蜗牛中分离纯化了均一的酸性多糖AFG，得率为0.88%，其Mw为23.84kDa，通过理化分析及波谱检测可以判断，AFG是由等摩尔的氨基葡萄糖GlcNAc和2位硫酸酯基取代的艾杜糖醛酸(IdoA2S)通过α(1→4)糖苷键交替连接而成，与非洲大蜗牛来源GAG结构基本一致.与哺乳动物来源的肝素和硫酸乙酰肝素相比，AFG的结构相对规则.糖苷键选择性的β-消除解聚法解聚显示，除糖苷键裂解外，其他基本结构稳定，其确切结构可进一步通过纯化寡糖确证，即利用bottom-up策略研究AFG的确切结构.

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