不同滤膜过滤人免疫球蛋白效果的影响
导读:本文天津津腾实验设备有限公司比较不同种类预过滤膜对纳米膜过滤人免疫球蛋白效果的影响。
来源：未知
发布日期：2019-12-25 09:59【大 中 小】
本研究天津津腾实验设备有限公司选择不同预过滤膜与纳米膜过滤IgG，探讨其对蛋白回收率及通量的影响，并进行去除猪细小病毒过滤验证，为规模化生产中纳米膜的选择提供实验依据。
1.纳米膜通量筛选试验
A、B、C厂的预过滤膜分别与本厂的纳米膜连接，分别加入20mL的缓冲液（250mmol辕L甘氨酸，pH3.93），将压力调至3.0bar，保持10min，检测缓冲液的滤速后，排空上游水，并将下游出口浸没于水中，系统加压至6bar，检测系统及膜完整性。检测合格后卸去压力，排空上游缓冲液，进行通量筛选试验。将1000mL样品分别过滤一定时间，比较预过滤膜的过滤效果。
2.纳米膜过滤去除病毒验证
将筛选的预过滤膜依次过滤注射用水及缓冲液各200mL；1000mL样品中加入1%PPV原液，混均后取样（放室温20h后冻存于-30益），分别进行预过滤后再进行纳米膜过滤；当下游出现第1滴纳滤样品时开始计时并称重，前15min，每1min记录1次，之后每5min记录1次至60min，每10min记录1次至120min，每30min记录1次至滤速降低到开始滤速的1%，终止过滤。每滤出10mL记为1个样品（放室温20h后于-30益冻存备用），称重法确定滤出液质量并计算速率。
3.讨论
本实验用的IgG浓度为53g辕L，蛋白浓度较高，对于孔径为20nm的纳米膜去除病毒的作用有较大的挑战。实验结果显示，B厂的纳米膜过滤通量优于A厂，2个厂家约1200min的过滤通量分别为3.74和2.39L辕（m2·h），对指示病毒PPV的去除效果分别为逸4.25和逸4.63LgTCID50辕0.1mL，蛋白回收率均在96%以上，表明纳米膜过滤基本上不影响蛋白的回收率。天津津腾实验设备有限公司通过本次实验，为今后的规模化生产中纳米膜的选择提供了依据。虽然纳米膜有良好的病毒去除能力，但不能作为单独的病毒灭活辕去除步骤使用。为确保制品安全，生产工艺中需采用多种不同机制的方法联用，如结合S辕D、pH4、巴氏等技术以提高病毒安全性。作为一种强有力的病毒去除方法，纳米膜过滤已经被证明不会引起蛋白的改变，根据膜截留量和蛋白相对分子质量大小选择适当孔径的纳米膜进行过滤，蛋白质回收率较高。纳米膜结合其他已经得到认可的病毒灭活方法的使用，具有针对性强、实用性广、毒性小、下游污染少及蛋白活性高且回收率高等优点，为制备更安全的血液制品做出了巨大的贡献。本实验表明，预过滤膜对纳米膜过滤的影响较大，直接影响过滤通量、衰减率及蛋白质的回收率，预过滤膜的筛选可为后续的除病毒过滤验证提供帮助。
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