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基于微孔滤膜截留的生物样品处理原理
导读:是利用滤膜的选择性实现溶液中不同物质的分离、纯化和浓缩的分离技术。根据滤膜孔径可以分为微滤、超滤、纳滤和反渗透,其分离范围;根据材料又可分为无机膜和有机膜,无机膜
来源:未知
发布日期:2020-03-13 10:09【
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采用微滤技术在全密闭流路中实现空间培养或搭载的动物细胞与培养基的分离,再经过等渗氯化钠溶液的清洗,采用RIPA裂解液使细胞膜破碎,释放细胞内容物,并使用FITC对细胞中的蛋白质和氨基酸等物质进行荧光衍生化,为荧光检测装置提供样品。
利用微滤技术实现细胞分离膜分离
是利用滤膜的选择性实现溶液中不同物质的分离、纯化和浓缩的分离技术。根据滤膜孔径可以分为微滤、超滤、纳滤和反渗透,其分离范围;根据材料又可分为无机膜和有机膜,无机膜主要是陶瓷和金属膜,过滤精度低,选择性差,而有机膜是由高分子材料制成,如醋酸纤维素膜、
聚醚砜膜
、聚氟聚合物膜等。微滤又称微孔过滤,基本原理是筛孔分离作用,当膜表面存在一定压力差的时候,微滤膜只允许比膜孔径小的分子通过,而将大于孔径的病毒、微生物及颗粒等物质截留,其截留特性是以膜孔径表征,通常其孔径范围在几十纳米到几微米之间。
本实验室培养的动物细胞直径一般在10μm以上,因此本文选用5μm孔径的
微孔滤膜
,可以截留培养基中的悬浮细胞而透过培养液,进而实现二者的分离。这一过程是一种纯粹的物理过程,并未发生相变和化学变化,可以最大限度的保证样品不受污染。实现这一过程所需硬件体积小,结构紧凑,而且过程简单易操作,仅仅需要在膜表面施加一定的压力差即可,可以方便的集成在密闭的流路中。
基于微孔滤膜的悬浮细胞截留与清洗效果
微孔过滤的原理是利用多孔材料的拦截能力,主要通过物理筛分的方式截留溶液中一定大小的颗粒,膜的物理结构起决定作用。U251细胞悬浮后直径在10μm以上,本文选择了孔径为5μm的微孔滤膜截留细胞悬液中的细胞。
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