针筒式过滤器在黑土豆中提取的应用！

导读:以黑土豆为研究对象，采用高效液相色谱法对微波提取的黑土豆提取液中的花青素含量进行测定。

来源：未知发布日期：2019-11-26 10:15【大中小】

黑土豆果皮呈黑紫色，该品种富含花青素，花青素除对致癌物质有抑制作用外，还可以增强人体免疫力，延缓衰老，增强体质，增强视力。花青素的检测方法主要有分光光度法、高效液相色谱法。目前，针对黑土豆中花青素提取研究不多，本研究天津津腾实验设备有限公司采用微波辅助、乙醇提取黑土豆中的花青素，高效液相色谱法（HPLC）测定提取液中花青素的含量，在单因素试验的基础上，通过响应面分析法进行优化，确定最优提取条件，为黑土豆在营养保健、食品、医药等领域的应用提供参考依据。

1仪器
LC-20AT高效液相色谱仪、SPD-20A紫外-可见检测器：日本岛津公司；TP150超声波清洗机：天鹏电子新技术（北京）有限公司；GM-0.33A隔膜真空泵(无油)：天津市津腾实验设备有限公司；电子分析天平：赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；1000mL溶剂过滤器：天津市津腾实验设备有限公司；Joyoung/九阳V5压榨机：九阳股份有限公司；WTS03-1微波提取器：南京杰全设备公司。

2花青素提取流程
从磨口广口瓶中量取5mL浆汁，置于微波萃取器中，在一定的温度下，按照一定的体积比加入一定浓度的乙醇，提取一定的时间后，提取液冷却至室温后，取澄清滤液，用0.45µm津腾针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于100mL容量瓶中，备用。

3花青素标准曲线的建立
精密称取干燥至恒重的花青素标准品10mg，置于100mL容量瓶中，用无水乙醇定容，配成0.1mg/mL的花青素对照品溶液，摇匀，取澄清滤液，用0.45µm津腾针筒式滤膜，过滤器过滤，滤液于10mL容量瓶中，备用。色谱条件为色谱柱：ShmadzuShim-pack-vpODS（150mm×4.6mm，5µm）；柱温：室温；流动相:甲醇(0.02mol/L)-甲酸(95∶5)，流速：1.0mL/min；进样量：10μL。准确量取配制好的标准溶液3、6、9、12、15、18mL，转移至100mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，混匀，按色谱条件进行测定，分别记录色谱峰面积，以黑土豆中花青素的质量浓度为横坐标C(mg/mL)，色谱峰面积A为纵坐标绘制标准曲线，计算出标准曲线的回归方程。

4结论
对黑土豆中花青素进行微波萃取，通过响应面优化最佳纯化条件，通过HPLC法测得黑土豆中花青素的含量来验证，最后确定微波萃取黑土豆中花青素优化条件为乙醇的浓度60%，料液体积比1∶20，微波辅助提取温度50℃、微波辅助提取时间20min，测得黑土豆中花青素的含量为0.1667mg/mL，与响应面优化时预测值相对误差为0.0026mg/mL，故响应面法确定的工艺条件准确可靠、具有实际应用价值。

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