微孔滤膜在连翘活性成分含量研究中的应用

导读:连翘为木犀科连翘属落叶灌木，以野生为主。根据连翘果实成熟程度，商品中有青翘和老翘之分。连翘在中国分布广泛，根据连翘资源的历史收购情况，山西收购量约占总收购量的40%，

来源：未知发布日期：2020-11-13 17:49【大中小】

连翘为木犀科连翘属落叶灌木，以野生为主。根据连翘果实成熟程度，商品中有青翘和老翘之分。连翘在中国分布广泛，根据连翘资源的历史收购情况，山西收购量约占总收购量的40%，河南约占30%，陕西约占20%，此外，湖北和安徽也是连翘资源的主产区。虽然同种药材的遗传特性具有相似性，然而由于地域和气候等自然条件的差异，其化学成分的含量会有差异。天津津腾实验设备有限公司了解到本试验收集了连翘主产区的5省13批连翘药材，采用高效液相色谱法，对样品中的芦丁、连翘酯苷A、连翘苷、齐墩果酸和熊果酸等5种活性成分进行了含量测定，并对测定结果进行主成分分析和聚类分析，比较不同产地青翘和老翘中5种活性成分的综合差异，旨在为连翘资源的综合利用提供一定的科学依据。

1仪器和试剂
仪器:1260型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);HZK2064B型鼓风干燥箱(重庆汉瞻仪器有限公司);BS-124S型万分之一天平(赛多利斯科学仪器（北京）有限公司);KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);DL-5-B型粉碎机(上海安亭科学仪器厂)。

2混合对照品溶液的制备
精密称取芦丁、连翘酯苷A和连翘苷标准品，分别为10.0mg、8.5mg和9.5mg，用甲醇溶解后定容于25mL容量瓶中，用0.45μm津腾微孔滤膜过滤，即得芦丁、连翘酯苷A和连翘苷质量浓度分别为0.40mg/mL、0.34mg/mL和0.38mg/mL的混合对照品溶液Ⅰ。精密称取齐墩果酸对照品13.5mg，熊果酸对照品14.3mg，用甲醇溶解后定容于25mL容量瓶中，用0.45μm津腾微孔滤膜过滤，得到齐墩果酸和熊果酸质量浓度分别为0.54mg/mL和0.57mg/mL的混合对照品溶液Ⅱ。

3供试品溶液的制备
精密称取青翘和老翘(S1～S13)粉末(过40目筛)2.00g，分别置于具塞锥形瓶中，精密加入70%(体积分数，下同)甲醇50mL，密塞，称量质量，浸渍3h，超声(250W，40kHz)处理30min，放冷，再称量，用70%甲醇补足损失质量，摇匀，过滤，取续滤液，用0.45μm津腾微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。样品平行处理3次。

4结论
(1)建立了不同产地连翘的HPLC指纹图谱，在色谱条件下测定结果显示5种活性成分的线性关系良好(r=0.9993～0.9997);稳定性和重复性的ＲSD均小于2%;回收率为97.6%～102.3%，ＲSD为1.15%～1.84%。
(2)河南信阳青翘中的芦丁、连翘酯苷A和连翘苷的含量均为最高，同一产地青翘中这3种活性成分的含量高于老翘，从活性成分的含量来看，建议采摘青翘入药。
(3)主成分分析以5种主要活性成分含量为基础构建了连翘的质量评价函数，能够直观评价不同产地连翘药材的差异性，综合质量评价排序结果显示河南信阳青翘排在第1位，安徽六安青翘排在第2位，表明这两个产地青翘的综合质量评价相对较好。
(4)聚类分析将13批不同产地连翘分为4大类，主要是根据连翘的产地和青老翘采摘时间进行分类。除了安徽六安老翘，同属于秦岭和伏牛山脉的河南和陕西主产区的青翘和老翘各聚为一类，同属于大别山脉的河南信阳和安徽六安的青翘聚为一类，而山西太原和山西长治的青翘聚成一类。聚类分析结果对于连翘资源的综合利用具有一定的指导意义。

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微孔滤膜在连翘活性成分含量研究中的应用

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